）传感渠道，用于无指示剂的均相生物剖析。该渠道经过导电性生物传感技能与陈述体系的结合，完成了在无需外源电活性指示剂的状况下进行方针检测。研讨以

　　BPCL-2，结合光电倍增管（PMT）操作电压为-800V，用于丈量ECL发光强度。

　　ITO玻璃板的预备：从供货商处收购电阻小于6Ω/平方的ITO玻璃板，并在其上制造导电BPE，保证传感池包含BPE的阴极和驱动电位的阳极，而陈述池包含BPE的阳极和驱动电位的阴极。

　　电堆积金：为了更好的进步导电性，分别在BPE的阴极和驱动电位的阴极上进行金电堆积。

　　反响混合：在超纯水中混合探针DNA、H1和H2，浓度分别为0.5μM、5μM和5μM。

　　方针miRNA-21的添加：将不同浓度的miRNA-21参加混合物中，37°C孵育2小时以进行HCR反响。

　　电泳条件：在TBE缓冲液（1×）中，安稳电压80V，室温下进行2小时电泳。

　　成像剖析：运用生物分子成像仪拍照凝胶，以验证探针DNA、H1和H2的杂交状况。

　　ECL丈量：运用循环伏安法，电位规模为1.0-4.5V，扫描速率为100 mV/s，进行ECL丈量。每个样品丈量三次，核算标准偏差。

　　PAGE剖析（图1A）：短核酸（探针、H1、H2）在低分子量方位显现荧光带，而miRNA-21诱导的核酸聚合物在高分子量方位显现。这验证了方针miRNA-21触发了探针、H1和H2的杂交反响。

　　导电性丈量（图1B）：混合短核酸后溶液的导电性显着地添加，而参加miRNA-21后，导电性显着下降。这标明生成的长核酸聚合物导电性较差。

　　ECL丈量（图1C）：ECL强度在短核酸（22 bp）溶液中显着高于长核酸（1250 bp），进一步验证了导电性对BPE-ECL体系的重要影响。

　　ECL呼应的验证（图1D）：相较于无miRNA-21存在的状况（曲线g），miRNA-21存在时ECL呼应显着下降（曲线h），由于miRNA-21诱导的HCR生成了导电性较差的核酸聚合物。

　　探针浓度（图2A）：ECL强度差值（ΔECL）跟着探针浓度的添加而添加，在浓度超越0.5μM后到达渠道期。因而，选用0.5μM作为最佳探针浓度。

　　H1/H2浓度（图2B）：跟着H1/H2浓度的添加，ΔECL呼应继续增强，在5μM时到达饱满，标明5μM为最佳H1/H2浓度。

　　温度（图2C）：ΔECL呼应跟着温度上升至37°C后添加，随后略有下降，标明最佳反响温度为37°C。

　　反响时间（图2D）：ΔECL呼应随HCR反响时间的延伸而添加，在120分钟后到达最大，挑选120分钟作为最佳反响时间。

　　miRNA-155）的检测依据成果得出，BPE-ECL传感体系对miRNA-21具有十分杰出的特异性。(3).安稳性和重复性（图4B, 4C）：ECL信号在八次重复丈量中安稳，RSD

　　2.56%，三种不同浓度miRNA-21的RSD分别为3.2%、2.4%和1.4%，标明体系具有十分杰出的安稳性和重复性。(4).实践使用（图4D）：检测不同数量MCF-7细胞裂解液中的miRNA-21

　　ECL信号随细胞数量添加而下降，验证了该传感渠道在临床样品检测中的使用潜力。图4. (A)不同miRNA类似物的ECL

　　反响生生长链核酸聚合物，导致传感池导电性下降，从而削减陈述池的ECL信号输出。该渠道具有传统BPE-ECL传感器的长处，经过物理别离传感和陈述反响有用避免了搅扰，且无需外源电活性指示剂。该计划简略、活络、快速，并在实践样品检测中表现出杰出的使用远景。未来，该计划有望进一步使用于包含DNA、小分子、蛋白质、细胞和细菌等多种方针的定量和定性检测。*因学问有限，不免有所遗漏和错误，恳请批评指正*

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